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Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I

產(chǎn)品信息

鼠尾膠原蛋白I（細(xì)胞培養(yǎng)基）

產(chǎn)品描述

膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布為廣泛。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成300nm長的異源多聚體。當(dāng)用作凝膠時(shí)，膠原蛋白有助于體外培養(yǎng)并增強(qiáng)細(xì)胞特異性形態(tài)和功能的表達(dá)。膠原蛋白也可用于薄層以促進(jìn)附著，應(yīng)用包括研究腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移，單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)或分化研究，以及粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的放射自顯影研究。膠原I還用于維持肝細(xì)胞功能，分化狀態(tài)和肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平的升高等研究。
本品是來源與鼠尾，溶于0.02M HAc溶液，濃度為3~4mg/mL，通過SDS-PAGE測定純度大于90 %，無菌。

鼠尾膠原蛋白I（細(xì)胞培養(yǎng)基）

產(chǎn)品屬性

CAS號：9007-34-5  

分子式：NULL  

英文名稱：Collagen

英文同義詞：Collagenpowder ;collagens ;BOVINE COLLAGEN TYPE II;COLLAGEN TYPE IV, HUMAN;COLLAGEN, TYPE IV, HUMAN PLACENTA;COLLAGEN TYPE IV (HU PLACENTA);COLLAGEN TYPE V (HU PLACENTA);COLLAGEN, TYPE 5

中文同義詞：膠原粉 ;膠原;骨膠原;膠元蛋白;膠原I蛋白;鼠尾膠;膠原蛋白I;膠原質(zhì)

注意事項(xiàng)
1） 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2） 整個(gè)操作請于冰上進(jìn)行，因室溫下膠原蛋白I可迅速成膠。
3） 整個(gè)操作請?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細(xì)胞生長。

使用說明
膠原蛋白I可凝膠到蓋玻片或組織培養(yǎng)皿上或用作細(xì)胞附著的薄膜涂層。細(xì)胞可在凝膠頂部，凝膠內(nèi)或凝膠層之間培養(yǎng)。
薄層包被（Thin coating）程序：
【注意】：包被濃度為5-10μg/cm2，推薦濃度可選5μg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。
1）膠原蛋白I用0.02M乙酸稀釋配置50μg/mL工作液，膠原蛋白I不溶于中性pH溶液。
2）以5μg/cm2涂布培養(yǎng)皿，例如：一個(gè)35mm的培養(yǎng)皿的表面積約為10cm2，1~2mL的工作液足以覆蓋此皿。
3）室溫孵育1小時(shí)。
4）小心吸取剩余溶液，用PBS或無血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸。
5）組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用，也可風(fēng)干，在2-8℃無菌條件下可貯存長達(dá)一周。
膠凝程序：
膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到堿性時(shí)凝膠
1）將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上，暫放置一邊。
2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據(jù)需要改變，膠原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的蓋玻片。 對于直徑100mm的培養(yǎng)皿，每個(gè)加入約6mL; 對于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL，對于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL。
3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。
4）在無菌蒸餾水中（35mm培養(yǎng)皿加5mL，60mm培養(yǎng)皿加10mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無菌蒸餾水，放置在層流罩中過夜。
5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。

備用膠凝程序：
1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1M NaOH
2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的終濃度的體積。
3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。
4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。
4.1加入10×PBS（終體積/10）mL
4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）
終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）
_________________________        = 要加入的膠原蛋白量
瓶標(biāo)簽上具體濃度（見具體批號）
4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1M NaOH
4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：
添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）
4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中。
4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積，混勻，冰上備用。
5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時(shí)。
6）使用時(shí)，無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min。